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          產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP
           
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          產品名稱:
          小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP
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          產品特點:
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            小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP的詳細資料:

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          產品名稱

          小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP

          生長特性

          貼壁生長

          貨號

          EY-X63908

          細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP
          形態特性: 成纖維細胞

          生長特性: 貼壁生長

          特征特性: 這這株細胞生成一種可以感染小鼠細胞的載體。Psi2DAP細胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和*抗性基因。這株細胞通過Psi2細胞插入一個重組的逆轉錄病毒(DAP)基因組衍生而來。被這種Psi2DAP產生的載體感染的細胞表達的磷酸酯酶可用組織化學方法檢測,可以用作體內追蹤他們命運的標記。這些細胞也可能產生輔助病毒。檢測輔助病毒的方法或其他逆轉錄病毒技術,請參考Cepko,C.L.Lineageanalysisandimmortalizationofneuralcellsviaretroviru

          培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%

          傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。

          傳代情況: PN5

          凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

          支原體檢測: 陰性
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          產品特點:
          1、 使用方便:不需昂貴設備。
          2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
          3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
          4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
          5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
          6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
          7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
          8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
          培養操作步驟
          1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
          2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 
          3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
          4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 
          5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
          實驗要點及說明:
          1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
          2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
          3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
          4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
          5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
          操作流程:
          1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
          1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
          1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
          1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%*消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
          1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
          1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
          1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%*消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
          1.6 生長曲線 取指數生的細胞用*消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
          趨化因子配體3檢測試劑盒細胞名稱: 珍珠龍膽石斑魚吻端組織細胞系;PGSN形態特性: 上皮樣ELISA Kit for ChemokineLigand 3

          牙本質磷蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 鞍帶石斑魚腎臟組織細胞系;GGKD形態特性: 上皮樣dentin phosphoprotein

          牙本質涎蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 草魚背鰭組織細胞系;GCDF形態特性: 上皮樣human dentin sialoprotein

          順烏頭酶1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;9G2.5形態特性: 淋巴母細胞樣aconitase 1

          丙激酶同工酶R;L檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;H1A2形態特性: 淋巴母細胞樣Pyruvate kinase isozymes R;L

          CD320分子檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;2F8形態特性: 淋巴母細胞樣Cluster of differentiation 320

          β2轉鐵蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;F3A2形態特性: 淋巴母細胞樣β2 transferrin

          性別決定區Y框蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;CH3形態特性: 淋巴母細胞樣SOX-1

          骨骼肌肌動蛋白α1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;2F2形態特性: 淋巴母細胞樣smActinin-α1

          α橫紋肌肌動蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;4G1形態特性: 淋巴母細胞樣α-sarcomeric actin

          脊髓灰質炎病抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1C8形態特性: 淋巴母細胞樣poliovirus antibody

          乙型流感嗜血桿菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;4F2形態特性: 淋巴母細胞樣Haemophilus influenzae type b antibody

          腦膜炎雙球菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人癌多藥耐藥細胞株;MCF-7/ROS形態特性: 上皮樣Neisseria meningitidis antibody

          囊泡單胺轉運蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 穩定表達GFP的shRNA靶向干擾YB-1基因人肺腺癌A549細胞株;A549/YBX1-homo-326形態特性: 上皮樣Vesicular Monoamine Transporter 2

          無翅型MMTV整合位點家族成員11檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1H9形態特性: 淋巴母細胞樣Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11

          5-羥色胺受體1B檢測試劑盒細胞名稱: 分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株;4H11形態特性: 淋巴母細胞樣5-Hydroxytryptamine Receptor 1B

          抗*抗體檢測試劑盒細胞名稱: 過表達CADM1的骨肉瘤細胞株;U-2os-CADM1形態特性: 上皮樣Anti trypsin antibody
          小鼠胚胎成纖維細胞;Psi2DAP長春質2468-21-5英文名:Catharanthine  

          英文別名:(+)-3,4-Didehydrocoronaridine  

          CAS登錄號:2468-21-5

          分子式:C21H24N2O2

          分子量:336.42

          分子結構:

          規格:20mg/支

          純度:≥ 98%

          用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

          提取來源:夾竹桃科植物長春花Catharanthus roseus (L.)G.Don的全草

          藥理藥效:止痛、消炎、安眠、通便及利尿等。

          貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

          有效期: 2年 

          產品相關關鍵字: 小鼠胚胎成纖維細胞 Psi2DAP
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          021-69985169
          13611928337

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